Преимплантационное генетическое диагностирование эмбриона (PGD)

Что такое ПГД?

ПГД — это преимплантационная генетическая диагностика. Это передовой генетический тест, который используется в рамках экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) для определения хромосомного статуса эмбриона. В норме клетка человека содержит 46 хромосом, объединенных в 23 пары, причем половина из них наследуется от каждого из родителей.

При исследовании клетки трехдневного эмбриона в некоторых случаях может обнаружиться лишняя или, наоборот, недостающая хромосома. Это может стать причиной рождения ребенка с умственными и/или физическими отклонениями, такими как синдром Дауна.

Хромосомная аномалия также может помешать эмбриону прикрепиться к стенке матки, что исключает возможность наступления беременности. А у многих женщин, страдающих от привычного невынашивания беременности, это может привести к остановке развития эмбриона и, как следствие, к самопроизвольному выкидышу.

Какова вероятность хромосомных аномалий у моих эмбрионов?

Чем старше женщина, тем выше риск для ее яйцеклеток. Более 50% эмбрионов у женщин в возрасте от 35 до 39 лет имеют хромосомные аномалии. У женщин старше 40 лет этот показатель возрастает до 80% и выше. Именно поэтому у женщин старшего возраста значительно ниже шансы на успешную беременность и выше риск выкидышей.

Кроме того, считается, что у пациенток с привычным невынашиванием беременности, независимо от возраста, образуется больше эмбрионов с хромосомными нарушениями.

Как ПГД повышает шансы на успешную беременность?

Исследования показали, что ПГД позволяет:

• вдвое увеличить шансы на имплантацию эмбриона
• снизить риск невынашивания беременности в три раза
• повысить вероятность рождения здорового ребенка.

Данные также свидетельствуют о снижении частоты выкидышей у пациенток ЭКО, у которых в анамнезе не было привычного невынашивания, с 23% до 9%.

У женщин, средний возраст которых составлял 40 лет, было обнаружено, что шанс на успешную имплантацию эмбриона удваивался.

Подходит ли мне ПГД?

Женщины с привычным невынашиванием беременности, а также те, кто столкнулся с трудностями при зачатии, являются основными кандидатами на проведение ПГД.

Как и когда проводится ПГД?

ПГД можно провести только в рамках протокола ЭКО — после того, как репродуктолог извлечет яйцеклетку, оплодотворит ее спермой партнера и перед тем, как перенести эмбрион обратно в матку.

После создания эмбрионов в лаборатории их культивируют в течение 3 дней. К этому времени эмбрионы содержат примерно 8 клеток. Каждый эмбрион на этой стадии называется бластомером. 

Эмбрионы помещают под мощный микроскоп, и с помощью тончайших стеклянных инструментов в блестящей оболочке (прочной внешней мембране, удерживающей эмбрион) делается небольшой надрез. В зависимости от состояния и размера эмбриона из него извлекают одну или две клетки. Затем разрез смыкается, и ни одна клетка не может случайно «выпасть».

Генетики используют метод под названием FISH (флуоресцентная in situ гибридизация), чтобы определить хромосомный набор клетки и выбрать наиболее подходящие эмбрионы для переноса в матку женщины. В это время, пока идет ПГД, эмбрионы спокойно развиваются в инкубаторе.

В некоторых случаях могут быть исследованы полярные тельца — две маленькие клетки, которые образуются при созревании яйцеклетки до оплодотворения. Однако это дает генетическую информацию только о самой яйцеклетке и не позволяет выявить аномалии, которые могут возникнуть после ее оплодотворения сперматозоидом.

На 5-й день женщина возвращается в клинику EMBIO, чтобы обсудить результаты своего теста ПГД. Наша команда врачей поможет ей принять решение о том, сколько эмбрионов будет перенесено в матку.

 

Доктор Парасхос принимал участие в первом в мире ПГД.

Узнайте у доктора Парасхоса все, что вас интересует о преимплантационной диагностике в EmBIO!

Флуоресцентная in-situ гибридизация (FISH)

Тестирование ПГД отличается от большинства генетических тестов, так как оно проводится всего на одной или двух клетках эмбриона и должно быть завершено в течение 48 часов, чтобы обеспечить перенос эмбриона на 5-й день. Поскольку стандартный анализ хромосом занимает несколько дней, используется другой метод, называемый флуоресцентной in-situ гибридизацией (FISH).

Каждая хромосома имеет уникальные участки ДНК, присутствующие только на ней. Небольшой ДНК-зонд используется для распознавания этих уникальных последовательностей и флуоресцирует, или светится, когда прикрепляется к хромосоме. Каждый зонд светится своим цветом, что позволяет одновременно тестировать несколько хромосом. Этот метод называется FISH (флуоресцентная in-situ гибридизация).

В клинике EmBIO метод FISH используется для хромосом 13, 15, 16, 18, 21, 22, X и Y, поскольку именно в них чаще всего встречаются аномалии. В нормальной клетке должно быть 2 сигнала FISH (или огонька) для каждой пронумерованной хромосомы и либо 2 сигнала X для женского эмбриона, либо 1 сигнал X и 1 сигнал Y для мужского. Можно использовать только пять разных цветов, поэтому большинство тестов проводится в два этапа. Сначала тестируются первые 5 хромосом, затем эти зонды смываются, и тестируются остальные хромосомы. Процесс смывания может повлиять на целостность каждой хромосомы, поэтому на одну клетку используется не более двух циклов FISH. По этой причине невозможно проверить все хромосомы.

Пример стандартного теста на анеуплоидию методом FISH, показывающий две копии каждой из проверенных хромосом:

Гарантирует ли ПГД 100% точность?

ПГД, единственный доступный тест для выявления анеуплоидии, имеет точность более 90%. Вероятность ложноположительного результата составляет всего 4,7%. Тем не менее, для исключения ложноотрицательного результата (когда аномальный эмбрион классифицируется как нормальный) все же рекомендуется проводить пренатальное тестирование с помощью биопсии хориона (CVS) или амниоцентеза.

Безопасна ли процедура ПГД?

Да. Данные многолетних исследований ПГД на животных и примерно 1200 случаев рождения детей у людей показывают, что ПГД не увеличивает риск врожденных дефектов или хромосомных нарушений. ПГД проводится до того, как генетический материал эмбриона становится «активным».

Поскольку процедура проводится на очень ранней стадии, все клетки внутри эмбриона еще идентичны, и каждая из них способна стать любой частью будущего ребенка. Удаление нескольких клеток на ранней стадии развития эмбриона не влияет на его способность развиться в полноценную, здоровую беременность.

Существуют ли риски для эмбриона?

ПГД не влияет на нормальное развитие эмбриона или плода. По оценкам, удаление одной клетки снижает способность эмбриона к имплантации менее чем на 3%.

Каким пациентам ПГД принесет наибольшую пользу?

Практически все пары старше 35 лет без истории повторных неудач ЭКО являются отличными кандидатами. Исследования показывают, что ПГД также может быть полезно женщинам с привычным невынашиванием беременности, предыдущими беременностями с анеуплоидией, известными хромосомными аномалиями и моногенными дефектами. Пока неясно, будет ли эта процедура эффективна для женщин с многократными неудачными попытками ЭКО. При любой из этих проблем причина может крыться в хромосомах как мужчины, так и женщины.

* Читать далее: Показания к ПГД

Сколько стоит ПГД?

Стоимость ПГД добавляется к стоимости вашего цикла ЭКО. Однако вы можете выбрать программу «Расширенное ЭКО с ПГД», которая включает тест ПГД для 5-дневных эмбрионов. Ознакомьтесь со стоимостью ЭКО в EmBIO.

Как выбирают эмбрионы для переноса?

Для переноса следует выбирать эмбрионы, у которых нормальные результаты тестов сочетаются с хорошим внешним видом. Иногда эмбрионы с нормальными генетическими тестами имеют физические проблемы, которые мешают их нормальному росту. В других случаях эмбрионы с аномальными генетическими тестами могут выглядеть физически нормальными. Сочетание нормального генетического тестирования и нормального внешнего вида дает самые высокие шансы на здоровую беременность.

Какие физические характеристики используются для определения нормального внешнего вида?

Эмбриологи присваивают эмбриону «балл» на основе однородности размера различных клеток, количества клеточных фрагментов и других критериев, отражающих внешний вид эмбриона. Эмбрионы, у которых на 3-й день менее 5 клеток, или эмбрионы с низким баллом редко успешно имплантируются в матке.

Хотя морфология эмбриона помогает выбрать лучшие эмбрионы для переноса, известно, что многие эмбрионы со значительными хромосомными аномалиями имеют нормальную морфологию. Даже среди эмбрионов, успешно достигших продвинутой стадии развития (бластоцисты), 25% все еще являются хромосомно аномальными! В сочетании с морфологией эмбриона скрининг на анеуплоидию помогает выбрать лучшие эмбрионы для переноса в цикле ЭКО.

Что делать, если не все здоровые эмбрионы были использованы?

Все решения о том, какие эмбрионы переносить и как использовать оставшиеся, принимаются совместно парой и их врачом(ами).

Чтобы записаться на первичную консультацию к одному из наших репродуктологов, пожалуйста, позвоните по телефону +30 2106774104 или напишите доктору Парасхосу.

Что бы вы хотели спросить у нашего специалиста по ПГД?

Следующие вопросы могут помочь вам сформулировать вашу проблему для специалиста по ПГД в клинике EmBIO.

• Вы женщина старше 35 лет?
• У вас было несколько выкидышей?
• У вас была предыдущая беременность с хромосомной аномалией?
• У вас было несколько неудачных циклов ЭКО?
• Зачатие было затруднено из-за низкого количества сперматозоидов?
• Вы или ваш партнер являетесь носителем сбалансированной структурной хромосомной перестройки?
• У вас есть семейная история болезни Гентингтона?
• Вы или ваш партнер являетесь носителем рецессивного генетического заболевания, такого как муковисцидоз?
• Вы или ваш партнер являетесь носителем Х-сцепленного генетического заболевания, такого как гемофилия или мышечная дистрофия Дюшенна?
• Вы хотите запланировать пол ребенка в вашей семье (выбрать пол вашего эмбриона)?

Что нужно знать о хромосомах?

Если посмотреть на клетку под микроскопом, в ее центре, или ядре, можно увидеть нитевидные структуры. Это хромосомы, содержащие ДНК — нашу генетическую «дорожную карту». Нормальные человеческие клетки (у взрослых, детей, плодов и эмбрионов) содержат 46 хромосом в 23 парах, половина из которых наследуется от каждого родителя.

Состояние, при котором у эмбриона или зиготы больше или меньше 46 хромосом, называется анеуплоидией. Очень часто вероятность анеуплоидии увеличивается с возрастом женщины, но она может возникать и у женщин моложе 35 лет.

Анеуплоидные эмбрионы могут иметь лишние (трисомия) или недостающие (моносомия) хромосомы. Ребенок с лишней или недостающей хромосомой может родиться с умственными и/или физическими дефектами. Распространенным примером является синдром Дауна.

Как анеуплоидия влияет на мою способность зачать или выносить беременность?

Хромосомная аномалия (анеуплоидия) может помешать эмбриону прикрепиться к стенке матки, исключая любую возможность беременности. Она также может привести к остановке развития имплантированного эмбриона, что приводит к потере беременности.

* Читать далее: скрининг на анеуплоидию

Как ПГД может помочь улучшить мои шансы забеременеть или выносить ребенка до срока?

Исследования показывают, что ПГД на анеуплоидию:

• повышает шанс на имплантацию
• снижает риск потери беременности
• увеличивает число рождений живых детей.
• данные свидетельствуют о четырехкратном снижении частоты зачатий с хромосомными аномалиями после ПГД.

Моногенные заболевания

Термин «моногенное заболевание» относится к любому из сотен наследственных заболеваний, вызванных мутацией (изменением) в одном гене.

Распространенные примеры включают:

• муковисцидоз
• альфа- и бета-талассемия
• миотоническая дистрофия
• серповидноклеточная анемия
• мышечная дистрофия Дюшенна,
• синдром ломкой Х-хромосомы.

ПГД при моногенных заболеваниях позволяет избежать прерывания беременности.

Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) теперь доступна практически для всех моногенных заболеваний. Цель ПГД — предоставить пациентам с риском передачи наследственного заболевания своим детям шанс на здоровую беременность. ПГД значительно снижает вероятность того, что больной плод будет обнаружен во время пренатального тестирования, и, следовательно, уменьшает вероятность того, что родителям придется принимать трудное решение о прерывании беременности.

Услуга ПГД при моногенных заболеваниях

Программа ПГД для моногенных заболеваний оказалась чрезвычайно популярной, и за последние три года количество обращений удвоилось. Используемые методы находятся на переднем крае генетической диагностики, позволяя быстро получать высокоточные результаты. Тесты на моногенные заболевания в EmBIO обычно имеют точность 99% и выше, а результаты доступны в течение 24 часов после получения образца (диапазон 5-36 часов).

Уникальные тесты

Каждый тест на моногенное заболевание, выполняемый нашей лабораторией, разрабатывается специально для пары, запрашивающей ПГД. Каждый протокол учитывает уникальный генетический состав каждого человека, что позволяет создавать более надежные тесты.

Фактически, у нас есть возможность разрабатывать тесты ПГД для любого моногенного заболевания. Тесты ПГД для моногенных заболеваний разрабатываются специально для запрашивающей пары; поэтому требуется обширная предварительная подготовка. Циклы экстракорпорального оплодотворения не следует начинать до тех пор, пока случай не будет рассмотрен и не будет утверждена информация о конкретном времени подготовки.

Мы предлагаем HLA-типирование

В дополнение к ПГД на моногенные заболевания у нас есть возможность проводить HLA-типирование (типирование человеческих лейкоцитарных антигенов) эмбрионов.

Интерес к HLA-типированию эмбрионов растет, поскольку это позволяет родителям зачать ребенка, способного предоставить гистосовместимые стволовые клетки для спасения жизни больного брата или сестры. Стволовые клетки получают из пуповинной крови во время родов, а затем пересаживают больному сиблингу. Этот подход использовался для лечения детей с различными формами наследственной анемии и детей с лейкемией.

Ключевые особенности услуги ПГД при генных заболеваниях

• ПГД может помочь родителям избежать необходимости прерывания беременности
• Доступно практически для всех моногенных заболеваний
• Диагностические протоколы, разработанные индивидуально для пациентов
• Чрезвычайно высокая точность анализов
• Использует анализ гипервариабельных полиморфизмов для точного выявления контаминации
• Быстрые результаты
• Доступно HLA-типирование

Кариомэппинг — революционный генетический тест

Ученые разработали революционный тест, который позволит будущим родителям проверять свои эмбрионы почти на все известные генетические заболевания. Кариомэппинг основан на той же процедуре, что и ПГД (его разработал тот же врач). Однако он позволяет выявить все известные генетические заболевания в эмбрионах в течение нескольких недель (исключение составляют лишь те, что возникают внезапно из-за случайной мутации).

Инновации и новые услуги

В нашем центре мы постоянно стремимся расширять спектр услуг, предлагаемых нашим клиентам. В ближайшем будущем мы предложим новые технологии.

---