Diagnosi Genetica Preimpianto (DGP)

Che cos'è esattamente la DGP?

DGP è l'acronimo di Diagnosi Genetica Preimpianto. È un test genetico avanzato utilizzato in combinazione con la fecondazione in vitro per determinare lo stato dei cromosomi di un embrione. Una cellula normale ha 46 cromosomi suddivisi in 23 coppie, metà da ciascun genitore.

Se osserviamo una cellula di un embrione al terzo giorno, in alcuni casi, potrebbe avere un cromosoma in più o in meno. Questo può causare la nascita di un bambino con deficit mentali e/o fisici, come la sindrome di Down.

Un'anomalia cromosomica può anche impedire all'embrione di attaccarsi alla parete dell'utero, precludendo ogni possibilità di gravidanza. Oppure, come nel caso di molte donne che subiscono aborti spontanei ricorrenti, può arrestare lo sviluppo dell'embrione, causando un aborto spontaneo.

Qual è la probabilità di essere affetti da un'anomalia cromosomica?

Più si avanza con l'età, maggiore è la probabilità che gli ovociti ne siano affetti. Più del 50% degli embrioni di donne tra i 35 e i 39 anni presenta anomalie cromosomiche. Per le donne sopra i 40 anni, le percentuali salgono all'80% o più. Ecco perché le donne più mature hanno tassi di gravidanza molto più bassi e tassi di aborto spontaneo più alti.

Inoltre, si ritiene che le pazienti con aborti spontanei ricorrenti producano più embrioni cromosomicamente anomali, indipendentemente dall'età.

In che modo la DGP può migliorare le mie possibilità di una gravidanza di successo?

Gli studi hanno dimostrato che la DGP può:

• raddoppiare la possibilità di impianto dell'embrione
• ridurre la perdita della gravidanza fino a tre volte
• aumentare la probabilità di nascite vive.

I dati hanno persino riscontrato una riduzione degli aborti spontanei tra le pazienti sottoposte a FIVET che non avevano avuto aborti ricorrenti, dal 23% al 9%.

Nelle donne con un'età media di 40 anni, si è scoperto che la probabilità che un embrione si impianti con successo è raddoppiata.

Sono una candidata per la DGP?

Le donne con aborti spontanei ricorrenti, così come quelle che hanno avuto problemi a rimanere incinte, sono considerate buone candidate per la DGP.

Come e quando si esegue la DGP?

La DGP può essere eseguita solo come parte del processo di fecondazione in vitro, quando il medico specialista in FIVET ha prelevato l'ovocita dalla donna e questo è stato fecondato con lo sperma dell'uomo, prima di essere trasferito nuovamente nell'utero.

Dopo la creazione degli embrioni in laboratorio, questi vengono coltivati per 3 giorni. A questo punto, gli embrioni contengono circa 8 cellule. Ogni embrione in questa fase è chiamato blastomero. 

Gli embrioni vengono posti sotto un potente microscopio e strumenti di vetro molto piccoli vengono guidati per praticare una piccola incisione nella zona pellucida (una resistente membrana esterna che tiene insieme l'embrione). A seconda della salute e delle dimensioni dell'embrione, vengono prelevate una o due cellule. L'incisione si richiude immediatamente e nessuna cellula può "fuoriuscire" accidentalmente.

I genetisti utilizzano una tecnica chiamata FISH (ibridazione fluorescente in situ) per identificare la composizione cromosomica della cellula e determinare quali embrioni sono più adatti al trasferimento nell'utero della donna. Nel frattempo, durante la DGP, gli embrioni si sviluppano indisturbati in un incubatore.

In alcuni casi, possono essere analizzati i corpi polari, due piccole cellule prodotte dall'ovocita in maturazione prima della fecondazione. Questo fornisce informazioni genetiche solo dall'ovocita e non rileverà anomalie che potrebbero verificarsi dopo la fecondazione da parte dello sperma.

Il quinto giorno, la donna torna da EMBIO per discutere i risultati del suo test DGP. Il nostro team medico l'aiuterà a decidere quanti embrioni verranno trasferiti nel suo utero.

 

Il Dott. Paraschos ha partecipato alla prima DGP al mondo.

Chieda al Dott. Paraschos ciò che deve sapere sulla Diagnosi Preimpianto presso EmBIO!

Ibridazione fluorescente in situ (FISH)

Il test DGP si differenzia dalla maggior parte dei test genetici poiché viene eseguito su una o due sole cellule embrionali e deve essere completato entro 48 ore per consentire il trasferimento dell'embrione entro il quinto giorno. Poiché l'analisi cromosomica standard richiede diversi giorni, viene utilizzato un metodo diverso chiamato ibridazione fluorescente in situ (FISH).

Ogni cromosoma ha aree uniche di DNA presenti solo su quel cromosoma. Una piccola sonda di DNA viene utilizzata per riconoscere questi pattern unici e diventa fluorescente, o si illumina, quando si attacca al cromosoma. Ogni sonda emette una luce di colore diverso, permettendo di analizzare più cromosomi contemporaneamente. Questa tecnica è chiamata FISH (ibridazione fluorescente in situ).

EmBIO utilizza la FISH per i cromosomi 13, 15, 16, 18, 21, 22, X e Y, poiché sono i cromosomi più comunemente anomali. Una cellula normale dovrebbe mostrare 2 segnali FISH (o luci) per ogni cromosoma numerato e 2 segnali X per una femmina o 1 segnale X e 1 segnale Y per un maschio. Poiché si possono utilizzare solo cinque colori diversi, la maggior parte dei test viene eseguita in due parti. Si analizzano i primi 5 cromosomi, poi quelle sonde vengono rimosse e si analizzano i cromosomi rimanenti. Il processo di lavaggio può influire sull'integrità di ciascun cromosoma; pertanto, per ogni cellula vengono utilizzati al massimo due cicli di FISH. Per questo motivo, non è possibile analizzare tutti i cromosomi.

Un esempio di un normale test FISH per l'aneuploidia che mostra due copie di ciascuno dei cromosomi testati:

La DGP è accurata al 100%?

La DGP, l'unico test disponibile per determinare l'aneuploidia, ha un tasso di accuratezza superiore al 90%. C'è un tasso di errore per falsi positivi di solo il 4,7%. Tuttavia, per identificare un falso negativo (classificare un embrione anomalo come normale), si raccomanda comunque di eseguire test prenatali tramite villocentesi (CVS) o amniocentesi.

La DGP è sicura?

Sì. I dati provenienti da molti anni di DGP su animali e da circa 1200 nascite umane indicano che la DGP non aumenta i difetti congeniti o i disturbi cromosomici. La DGP viene eseguita prima che il materiale genetico dell'embrione diventi "attivo".

Poiché viene eseguita così precocemente, le cellule all'interno dell'embrione sono ancora tutte identiche e ogni cellula è in grado di diventare qualsiasi parte di un bambino. La rimozione di alcune cellule dell'embrione in fase iniziale non altera la sua capacità di svilupparsi in una gravidanza completa e normale.

Ci sono rischi per l'embrione?

La DGP non influisce sul normale sviluppo dell'embrione o del feto. Si stima che la rimozione di una cellula riduca la capacità dell'embrione di impiantarsi di meno del 3%.

Quali pazienti possono beneficiare della DGP?

Praticamente tutte le coppie sopra i 35 anni senza una storia di ripetuti fallimenti della FIVET sono candidate eccellenti. Gli studi dimostrano che possono beneficiare anche le donne con aborti spontanei ricorrenti, precedenti concepimenti aneuploidi, anomalie cromosomiche note e difetti monogenici. Non è chiaro se le donne con ripetuti fallimenti della FIVET siano buone candidate per la procedura. In ognuno di questi problemi, la causa può risiedere nei cromosomi dell'uomo o della donna.

* Leggi di più: Indicazioni per la DGP

Qual è il costo della DGP?

La DGP ha un costo aggiuntivo rispetto al ciclo di FIVET. Tuttavia, è possibile selezionare il pacchetto "FIVET Avanzata con DGP", che include un test DGP su embrioni al quinto giorno. Controlli i costi della FIVET presso EmBIO.

Come vengono scelti gli embrioni per il trasferimento?

Dovrebbero essere trasferiti gli embrioni che presentano sia un risultato del test normale sia un aspetto normale. A volte, embrioni con test genetici normali possono avere un problema fisico che impedisce loro di crescere normalmente. Altre volte, embrioni con test genetici anomali possono apparire fisicamente normali. La combinazione di un test genetico normale con un aspetto fisico normale indica la più alta probabilità di avere una gravidanza sana.

Quali caratteristiche fisiche vengono utilizzate per determinare un aspetto normale?

Gli embriologi assegnano un "punteggio" all'embrione basandosi sull'uniformità delle dimensioni delle diverse cellule, sul numero di frammenti cellulari presenti e su altri criteri che riflettono l'aspetto fisico dell'embrione. Gli embrioni che non hanno almeno 5 cellule al terzo giorno o che ricevono un punteggio basso raramente riescono a impiantarsi con successo nell'utero.

Sebbene la morfologia dell'embrione aiuti a scegliere i migliori embrioni per il trasferimento, è noto che molti embrioni con significative anomalie cromosomiche hanno una morfologia normale. Anche tra gli embrioni che raggiungono con successo uno stadio di sviluppo avanzato (blastocisti), il 25% è ancora cromosomicamente anomalo! In combinazione con la morfologia dell'embrione, lo screening per l'aneuploidia aiuta a selezionare i migliori embrioni da trasferire in un ciclo di FIVET.

Cosa succede se non vengono utilizzati tutti gli embrioni sani?

Tutte le decisioni su quali embrioni trasferire e su come utilizzare gli embrioni rimanenti saranno prese insieme alla coppia e al/ai loro medico/i.

Per fissare un appuntamento per una consulenza iniziale con uno dei nostri specialisti della riproduzione, chiami il numero +30 2106774104 o contatti via email il Dott. Paraschos.

Cosa vorrebbe chiedere al nostro specialista in DGP?

Le seguenti domande possono aiutarla a esporre il suo problema allo specialista in DGP di EmBIO.

• È una donna sopra i 35 anni?
• Ha avuto diversi aborti spontanei?
• Ha avuto una gravidanza precedente con un'anomalia cromosomica?
• Ha avuto diversi cicli di FIVET falliti?
• Il concepimento è stato difficile a causa di un basso numero di spermatozoi?
• Lei o il suo partner siete portatori di un riarrangiamento cromosomico strutturale bilanciato?
• Ha una storia familiare di malattia di Huntington?
• Lei o il suo partner siete portatori di una malattia genetica recessiva come la fibrosi cistica?
• Lei o il suo partner siete portatori di una malattia genetica legata al cromosoma X come l'emofilia o la distrofia muscolare di Duchenne?
• Desidera bilanciare il genere nella sua famiglia (selezionare il sesso del suo embrione)?

Cosa dovrei sapere sui cromosomi?

Se si osserva una cellula al microscopio, si vedranno delle strutture simili a fili nel centro della cellula, o nucleo. Questi sono i cromosomi, che contengono il DNA, la nostra mappa genetica. Le cellule umane normali (di adulti, bambini, feti ed embrioni) contengono 46 cromosomi suddivisi in 23 coppie, metà da ciascun genitore.

La condizione di avere un embrione o uno zigote con un numero di cromosomi superiore o inferiore a 46 è chiamata aneuploidia. Molto spesso, la probabilità di aneuploidia aumenta con l'età della donna, ma può verificarsi anche in donne sotto i 35 anni.

Gli embrioni aneuploidi possono avere cromosomi in più (trisomia) o mancanti (monosomia). Un bambino che nasce con un cromosoma in più o in meno può avere difetti mentali e/o fisici. La sindrome di Down ne è un esempio comune.

In che modo l'aneuploidia influisce sulla mia capacità di concepire o portare a termine una gravidanza?

Un'anomalia cromosomica (aneuploidia) può impedire all'embrione di attaccarsi alla parete dell'utero, eliminando ogni possibilità di gravidanza. Può anche causare l'arresto dello sviluppo dell'embrione impiantato, con conseguente perdita della gravidanza.

* Leggi di più: screening dell'aneuploidia

In che modo la DGP può aiutare a migliorare le mie possibilità di rimanere incinta o di portare a termine la gravidanza?

Gli studi rivelano che la DGP per l'aneuploidia:

• aumenta la possibilità di impianto
• riduce la perdita della gravidanza
• aumenta le nascite vive.
• i dati suggeriscono una riduzione di quattro volte della frequenza di concepimenti cromosomicamente atipici dopo la DGP.

Malattie monogeniche

Il termine malattia monogenica si riferisce a una qualsiasi delle centinaia di malattie ereditarie causate da una mutazione (cambiamento) in un singolo gene.

Esempi comuni includono:

• fibrosi cistica
• alfa e beta-talassemia
• distrofia miotonica
• anemia falciforme
• distrofia muscolare di Duchenne,
• sindrome dell'X fragile.

La DGP per le malattie monogeniche evita l'interruzione di gravidanza.

La Diagnosi Genetica Preimpianto (DGP) è ora disponibile per quasi tutte le malattie monogeniche. Lo scopo della DGP è offrire ai pazienti a rischio di trasmettere una malattia ereditaria ai propri figli la possibilità di iniziare una gravidanza non affetta. La DGP riduce drasticamente la probabilità che un feto affetto venga rilevato durante i test prenatali e, di conseguenza, diminuisce la probabilità che i genitori debbano affrontare la difficile decisione se interrompere o meno una gravidanza.

Il servizio di DGP per malattie monogeniche

Il programma di DGP per malattie monogeniche si è dimostrato estremamente popolare, con il numero di richieste raddoppiato negli ultimi tre anni. I metodi utilizzati sono all'avanguardia nella diagnosi genetica e forniscono rapidamente risultati altamente accurati. I test monogenici di EmBIO hanno generalmente tassi di accuratezza del 99% o superiori, con risultati disponibili entro 24 ore dalla ricezione del campione (range 5-36 ore).

Test unici

Ogni test monogenico eseguito dal nostro laboratorio è progettato specificamente per la coppia che richiede la DGP. Ogni protocollo tiene conto della composizione genetica unica di ogni individuo, consentendo la produzione di test più affidabili.

Di fatto, abbiamo la capacità di sviluppare test DGP per qualsiasi malattia monogenica. I test DGP per le malattie monogeniche sono progettati specificamente per la coppia che li richiede; pertanto, è necessaria un'ampia preparazione preliminare. I cicli di fecondazione in vitro non dovrebbero essere iniziati finché il caso non viene esaminato e non vengono approvate le informazioni relative ai tempi di preparazione specifici.

Offriamo la tipizzazione HLA

Oltre alla DGP per le malattie monogeniche, abbiamo la capacità di eseguire la tipizzazione dell'antigene leucocitario umano (HLA) degli embrioni.

C'è stato un crescente interesse per la tipizzazione HLA degli embrioni, poiché consente ai genitori di concepire un figlio in grado di fornire cellule staminali istocompatibili per salvare la vita di un fratello malato. Le cellule staminali vengono prelevate dal sangue del cordone ombelicale al momento della nascita e poi trasferite al fratello affetto. Questo approccio è stato utilizzato per curare bambini con varie forme di anemia ereditaria e bambini con leucemia.

Caratteristiche principali del servizio di DGP genica

• La DGP può aiutare i genitori a evitare di dover contemplare l'interruzione di gravidanza
• Disponibile per quasi tutte le malattie monogeniche
• Protocolli diagnostici personalizzati per i singoli pazienti
• Tassi di accuratezza dei test estremamente elevati
• Impiega l'analisi di polimorfismi ipervariabili per un'accurata rilevazione della contaminazione
• Risultati rapidi
• Tipizzazione HLA disponibile

Karyomapping, un test genetico rivoluzionario

Gli scienziati hanno sviluppato un test rivoluzionario che permetterà ai futuri genitori di testare i loro embrioni per quasi tutte le malattie genetiche conosciute. Karyomapping si basa sulla stessa procedura della DGP (è stato sviluppato dallo stesso medico), ma può rilevare tutte le malattie genetiche conosciute negli embrioni in poche settimane (le uniche eccezioni sono quelle che appaiono improvvisamente a causa di una mutazione accidentale).

Innovazione e nuovi servizi

Nella nostra unità, ci sforziamo continuamente di ampliare i servizi offerti ai nostri clienti. Nel prossimo futuro offriremo tecnologie innovative.