Stades de la Fécondation in Vitro

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Sont tous les œufs récoltés dans un cycle donné de la même qualité?

La qualité des œufs est une propriété qui est unique à chaque femme et à chaque cycle. Par conséquent, tous les œufs obtenus par prélèvement ne sont pas de la même qualité. Habituellement, 80% des ovocytes sont matures et le 20% restants sont immatures. Des œufs immatures ne sont généralement pas appropriés pour être utilisés en fécondation in vitro.

LE SPERME ARRIVE AU LABORATOIRE

Quand faut-il recueillir un échantillon de sperme?

Après la ponction des ovocytes, le mari/conjoint est demandé de produire un échantillon de sperme. L'échantillon est prélevé par masturbation dans un récipient stérile étiqueté à son nom. L'échantillon de sperme est ensuite transféré dans le laboratoire où il sera traité pour la procédure de FIV.

Est-ce qu’un échantillon de sperme peut être congelé lors de la première visite au centre?

Oui. Nous conseillons vivement de faire congeler un échantillon de sperme lors de la première visite au centre. De cette façon, le couple n'aura pas à venir au centre pour la ponction, mais uniquement lorsque les embryons seront prêts à être transférés.

Quelle est la procédure suivie quand du sperme de donneur est nécessaire?

Notre équipe fera attribuer un donneur de sperme approprié pour le couple ou, dans d’autres cas, pour une femme célibataire ou un couple lesbien. Des échantillons congelés de sperme de donneur sont généralement obtenus à partir de notre propre banque de sperme. Si les échantillons de sperme nécessaires ne sont pas disponibles, ils seront emmenés depuis une autre banque de sperme. Au même jour que la récupération des œufs, le sperme du donneur sélectionné sera traité de la procédure de FIV.

Est-ce que le sperme nécessite quelque préparation spéciale?

Oui. Les échantillons de sperme, soit celui du conjoint de sexe masculin obtenu par masturbation ou, dans d’autres cas, obtenu d’une banque de sperme, doivent être traités par centrifugation en gradient de densité avant qu'ils ne soient utilisés pour la FIV.

L'OEUF ET LE SPERME SONT INTRODUITS L'UN A L'AUTRE: LE PROCESSUS DE FECONDATION

Après plusieurs heures en culture, les œufs sont mis en contact avec le sperme afin que la fécondation puisse se réaliser.

En quoi consiste une Fécondation In Vitro conventionnelle?

La FIV est une des techniques les plus fréquemment utilisées en procréation assistée. Elle consiste à mettre l'ovule et le spermatozoïde en contact, pour s'assurer que les deux génomes se combinent. Lorsque l'échantillon de sperme est normal et il y a un historique de fécondation antérieur, l’insémination conventionnelle est performée. Celle-ci consiste à placer les œufs en contact avec une concentration particulière de sperme traité (cent mille spermatozoïdes bien motiles) en milieu de culture et les incuber à 37 º C jusqu'à ce que fécondation soit observée.

Comment est-ce que l’injection intracytoplasmique de spermatozoïdes est réalisée? Quand est-elle nécessaire?

Lorsque l'échantillon de sperme est de mauvaise qualité ou il n'y a pas d'antécédent de fertilisation, la technique utilisée est l'insémination par injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI).

L'ICSI est une technique très sophistiquée, exigeant un haut degré de précision, d'expertise et d'expérience par l'embryologiste. Elle consiste en l'introduction par injection d'un spermatozoïde vivant dans le cytoplasme de l'œuf.

Dans le cas du programme de don d'ovocytes, l'ICSI est absolument nécessaire, indépendamment de la qualité du sperme, afin d'assurer un taux élevé de fertilisation.

UN JOUR APRES LA FECONDATION IN VITRO

Que voyons-nous un jour après l’insémination?

Dix-sept à vingt heures après l'insémination, les œufs sont observés sous microscope inversé à 400x de grossissement pour voir si la fécondation a eu lieu. Un œuf fécondé a deux pronuclei: le pronucléus femelle et le pronucléus mâle. On peut voir les œufs qui ont été correctement fécondés, les œufs qui n'ont pas été fécondés et les œufs qui ont été fécondés de façon anormale.

Sont tous les œufs fécondés après la fécondation in vitro?

Non. Dans des conditions normales, en utilisant du sperme de l'éjaculat, le taux de fécondation par FIV aussi bien que par FIV-ICSI est d'environ 70%. Le premier cycle de FIV peut être considéré comme diagnostic et permet au personnel médical de déterminer le niveau du la fecondite du couple. Dans certains cas, on peut trouver des faibles niveaux de fertilisation (5-20%) ou même l'échec complet de fertilisation.

Sont les anomalies chromosomiques des embryons plus fréquentes en FIV par rapport aux cycles de conception naturelle?

Non. Bien que l'âge moyen des patients qui subissent leur premier traitement de FIV est plus élevé que dans la population générale, et, par conséquent, le risque d'anomalies des embryons est plus élevé, le taux d'anomalies génétiques chez les enfants nés par FIV est semblable à celui noté en conception naturelle.

DEUX JOURS APRES LA FECONDATION IN VITRO

Que voyons-nous deux jours après la fécondation in vitro?

La première division de l’embryon (un embryon à deux cellules ou blastomères) se produit généralement 25 heures après la fécondation. Quarante-huit heures après la fécondation, se déroule la deuxième division de l’embryon (embryon avec quatre blastomères). Toutefois, à ce point, puisque tous les embryons ne vont pas se développer au même rythme, certains embryons peuvent avoir 2, 3, 4 ou 5 cellules, avec des différents degrés de fragmentation entre les blastomères.

TROIS JOURS APRES LA FECONDATION IN VITRO

A quoi ressemblent les embryons trois jours après la fécondation?

Les embryons doivent avoir doublé le nombre de cellules qu'ils avaient le deuxième jour. Jusqu’au troisième jour depuis la culture, les embryons présentent entre 7 à 9 blastomères à des degrés différents de fragmentation. Quelques embryons peuvent être bloqués et leur développement peut s’arrêter entre le deuxième et troisième jour.

Tous les embryons sont-ils les mêmes?

Tout comme les êtres humains, il n’existe pas deux embryons qui soient identiques. Chacun a ses propres caractéristiques génétiques et morphologiques. Pas tous les embryons d’un même cycle ne sont de la même qualité. Les embryons sont soigneusement analysés avec un microscope inversé sous grossissement 400x et sont classés sur la base de leurs caractéristiques morphologiques (taux de division cellulaire, taille égale ou inégale des cellules et pourcentage de fragmentation cellulaire).

Les embryons sont classés de 1 à 10, où 10 est un embryon de 4 cellules de taille identique non-fragmentées au deuxième jour depuis la culture, et entre 7 et 9 cellules de taille identique non-fragmentées au troisième jour.

Qu'arrive-t-il aux embryons surnuméraires qui ne sont pas transférés? Peuvent-ils être congelés?

Oui, les embryons en «surplus» qui ne sont pas transférés dans l'utérus, sont cryopréservés en azote liquide à -196 º C, à condition qu'ils soient de bonne morphologie. Le cas échéant, ils ne seront pas congelés et seront rejetées.

Combien de temps les embryons peuvent-ils rester congelés pour être transférés plus tard?

Si les conditions de stockage des embryons dans des conteneurs d'azote liquide sont adéquates, théoriquement, ils peuvent être cryopreservés indéfiniment. À l'heure actuelle, nous disposons de données sur des embryons qui avaient été congelées pendant 13 ans et ont abouti à la naissance d'un enfant en bonne santé.

Quelle est la durée de temps pendant laquelle il est permis par la loi de garder des embryons congelés?

Le temps de stockage des embryons dépend de la législation spécifique à chaque pays.